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液相色谱(LC)
液相色谱是一种色谱分离方法,它基于两个不互溶的相之间的不同分配比来实现物质的分离。在这种系统中,流动相是液体,通常为水或其他有机溶剂,而固定相可以是多种材料,如纸、薄板、硅胶、聚合物或金属颗粒等。液相色谱可以通过吸附、质量分配、离心交换、尺寸排阻或立体化学相互作用等方式来进行分离。这种方法已经广泛应用于多个领域,包括但不限于分离有色和无色的物质,尤其是有机化合物。
1. 样品要求
1) 粉体样品需要提供20mg以上,液体样品需要提供0.5ml以上;
2) 品需易溶于水、甲醇或乙腈等溶剂。
2. 注意事项
1) 质测试与气质联用不同,没有行业标准的数据库因此默认不提供检索服务,但是如果能提供可能的目标物结构式,我们可以针对性的对结果进行定性分析;
2) 相设备精度较高,受环境湿度、温度等因素影响较大,因此不同批次做出来需要定量的材料需要单独做标样,不能使用某一次做出来的标曲;
3) 相配的是紫外检测器,因此部分没有紫外吸收的材料无法检测;
4) 样品含有无机盐离子,可自行除盐后寄样,或指定配备除盐配件的LCMS仪器。样品需要在常规溶剂中溶解性较好;
5) 规测试只能提供样品出峰时间以及半定量结果,无法区分每个峰是什么物质,如果需要定性以及定量分析的,需要自行提供标样,一个浓度标样算一个样品计费;
6) 有色谱质谱类测试,涉及参数往往很多。我们会依据您的参考文献,结合实验室现存条件与经验,尽量使用相同或者相似的参数或配件。由于测试影响因素太多,没有办法保证测试参数或结果完全符合您的预期;
7) 液相色谱是室温环境测试,因此当环境条件改变时同一成分的保留时间和强度等都会有差异,因此不同批测试的数据可能没有办法进行对比。
1. 板阻塞:柱子两头的过滤筛板如果堵塞,样品就会在筛板部分受阻而形成时间延迟,使得样品在柱后流出时 峰型形成拖尾。需要通过反冲色谱柱,或者更换筛板; 2. 谱柱塌陷:是指色谱柱由于其它原因引起了柱效率丧失,不能对物质形成保留,使得物质不在固定相上保留 而随流动相流出,但是又还有一点柱效,因此形成拖尾。需要重新填充色谱柱或者更换色谱柱; 3. 污染:即样品不在同一起跑线起跑,从后面开始跑得到达终点稍晚,表现出拖尾。更换色谱柱或者采用有机 溶剂梯度洗脱1h以上,以冲洗柱子; 4. 动相PH值选择错误:如某PH下有的样品存在分子型和离子型的动态平衡,离子型的陆续向分子型转化就会 表现出拖尾。调节PH值可抑制分子解离,改善拖尾,对于碱性化合物,相对较低的PH值更有利于得到对称 峰。
1. 筛板堵塞或柱失效,解决办法是反向冲洗柱子,替换筛板或更换柱子; 2. 存在干扰峰,解决办法为使用较长的柱子;改换流动相或更换选择性好的柱子 ; 3. 可能柱超载,减少进样量。
1. 温度控制不好,解决方法是采用恒温装置, 保持柱温恒定; 2. 流动相发生变化,解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等 ; 3. 柱子未平衡好,需对柱子进行更长时间的平衡。
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