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仪器型号:赛默飞Q-Exactive高分辨液质联用仪;赛默飞世尔U3000高效液相色谱;日本日立L-8800氨基酸全自动分析仪
测试周期:3-10个工作日
氨基酸
氨基酸,是含有碱性氨基和酸性羧基的有机化合物。羧酸碳原子上的氢原子被氨基取代后形成的化合物。动物肝脏、肾脏是氨基酸代谢的主要器官,尿液中氨基酸的变化能反应肝、肾的生理状态。另外,氨基酸还能反应灼伤、伤寒等方面情况。植物体内氨基酸含量对研究植物在不同条件下及不同生长发育时期氮代谢变化、植物对氮素的吸收、运输、同化及营养状况等有重要意义。
1. 样品要求
1) 粉末非纯样品提供2g左右,纯样或者含量高于50%可以提供150mg左右;
2) 溶液样品提供10ml以上。
2. 注意事项
1) 测试默认只测一次,测平行算多个样品;
2) 氨基酸测定目前有液相色谱法跟氨基酸分析仪两种方法来测试,两种方法测试的氨基酸种类略有不同,对此有要求的可提前确认。
17种氨基酸分别为:天冬氨酸,苏氨酸,丝氨酸,谷氨酸,脯氨酸,甘氨酸,丙氨酸,胱氨酸,缬氨酸,蛋氨酸,异亮氨酸,亮氨酸,酪氨酸,苯丙氨酸,赖氨酸,组氨酸,精氨酸。
取适量样品置于消解管中,加入3滴苯酚,以6M盐酸定容至5mL后冲入氮气并密封,100℃水解48h,适量稀释后,以PITC法进行衍生。100uL样液加入50uL三乙胺-乙腈溶液(1mol/L)和50uL PITC-乙腈溶液(0.1mol/L),混匀后室温静置2h。反应结束后,加入200uL正己烷,混匀后静置10min取下层溶液上机测试。(水解过程会根据样品实际情况调整,此方法仅供参考)
只能测氨基酸含量,如果知道蛋白质种类,可以选择定氮的方式做含量。
冻干的最好。
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